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實驗線蟲分離器
一、產品介紹
本款實驗線蟲分離器由玻璃漏斗、橡皮管、止水夾組成，適用于各植保站、森防站、獸醫(yī)站、衛(wèi)生防疫站以及高等院校和科研院所與線蟲研究有關的科室。
二、產品參數
1、玻璃漏斗
直徑：12cm，高度：30cm
2、橡皮管
直徑：1cm，長度：40cm
3、止水夾
長5。5cm，寬6。5cm
三、使用方法
1、貝爾曼漏斗法：
將玻璃漏斗（直徑為10–15 cm）置漏斗架上,下面接一段（10 cm左右）橡皮管,橡皮管上裝一個止水夾。取濕重10g劈成“火柴桿"狀大小的分離材料,用兩層紗布包好,放入漏斗中,然后放入清水,清水以浸沒分離材料為度。經過4–24小時,由于趨水性和本身的重量,線蟲離開植物組織,并在水中游動,最后沉降到漏斗底部的橡皮管中。打開止水夾,取底部約5–15ml的水樣,其中含有樣本中大部分活動的線蟲。在解剖鏡下檢查,如果線蟲的數量少,可以離心（1500 r/min,2–3 min）沉降后再檢查。
2、常規(guī)鏡檢：
分別將各標號盛有線蟲分離液的培養(yǎng)皿置于解剖鏡下觀察,先確認有無線蟲。對有線蟲的樣品進行活體鏡檢,觀察它的一般形態(tài)結構。然后選擇幾條成熟、特征易觀察的線蟲,用針或吸管移至載玻片上的水滴中。將此載玻片在酒精燈火焰上方往返幾次（5–6 s）或放置于已盛滿高溫熱水、打開蓋子的保溫瓶口上,蒸30–60 s至蟲體死亡,加蓋玻片后在顯微鏡下觀察。根據形態(tài)特征予以初步鑒別,以確定是否需作進一步的鑒定。
3、快速鏡檢：
（1）用顯微鏡直接觀察線蟲濃縮分離液。分離液經一定時間后,當漏斗下端和乳膠管內出現透明度降低甚至混濁現象、表明線蟲的游離量較多時,即可用培養(yǎng)皿接取混濁狀分離液3–5滴,直接置于解剖鏡下觀察；如有線蟲,就將盛有分離液滴的培養(yǎng)皿,放置于已盛滿高溫熱水、打開蓋子的保溫瓶口上,進行30–60 s的熱殺處理,擦干培養(yǎng)皿底部凝結的小水珠,直接放置于顯微鏡下（先用低倍物鏡,找到目標線蟲,再轉換到高倍物鏡）觀察形態(tài)特征予以鑒別。
（2）用顯微鏡直接觀察線蟲分離液。用培養(yǎng)皿盛放貝爾曼漏斗放出的線蟲懸液適量,直接移放在光學顯微鏡下觀察,用低倍鏡調整焦距,找到線蟲,一手移動培養(yǎng)皿,不斷變換所觀察線蟲的位置,一手不斷調整焦距。在10倍的接物鏡下松材線蟲的基本形態(tài)鑒定特征如頭部、中食道球、陰門、交合刺、尾形等都可以清晰地觀察到。發(fā)現分離液中存有松材線蟲時,挑取線蟲并制成臨時玻片標本進一步觀察。
四、形態(tài)鑒定：
依據雌雄成蟲的形態(tài),主要是雌成蟲的形態(tài)進行鑒定。但分離到的線蟲沒有成蟲或極少時,需進行培養(yǎng),以獲得大量雌雄成蟲供鑒定。
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